PLEKHG4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407381

Visão geral

PLEKHG4B codifica uma proteína semelhante a um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) para Rho, contendo domínios de homologia com pleckstrina e domínios relacionados a RhoGEF, envolvidos no acoplamento da sinalização por fosfoinositídeos à regulação de pequenas GTPases. Por meio da modulação da atividade de GTPases da família Rho, PLEKHG4B está associada ao controle da dinâmica do citoesqueleto de actina, do tráfego de membranas e de programas de morfologia celular que influenciam adesão e motilidade. Padrões de expressão e associações em redes posicionam PLEKHG4B em contextos de sinalização mais amplos, que se cruzam com vias relevantes para o sistema nervoso e o sistema imune, nas quais a remodelação do citoesqueleto é limitante. A desregulação da sinalização de GTPases Rho e de processos dependentes do citoesqueleto é recorrentemente associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, bem como a comportamento invasivo em modelos de câncer, o que motiva a investigação funcional de PLEKHG4B em estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PLEKHG4B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PLEKHG4B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PLEKHG4B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PLEKHG4B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PLEKHG4B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PLEKHG4B para a investigação da sinalização de PLEKHG4B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PLEKHG4B críticos para a função PLEKHG4B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PLEKHG4B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PLEKHG4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PLEKHG4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PLEKHG4B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PLEKHG4B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PLEKHG4B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PLEKHG4B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PLEKHG4B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.