Pin1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400485-NIC

인간 PIN1 유전자는 Pin1을 암호화하며, Pin1은 인산화 의존적 펩티딜-프롤릴 cis/trans 이성질화효소로서 Ser/Thr-Pro 모티프를 인식해 단백질의 안정성, 세포 내 위치, 신호 출력(signaling output)을 조절하는 구조적 스위치를 촉매합니다. Pin1은 프롤린 지향성 키나아제(proline-directed kinases)로부터의 입력 신호를 통합하고, cyclin D1, c-Myc, p53, tau 등의 기질을 통해 세포주기 진행, 전사 조절, DNA 손상 반응, 스트레스 신호전달의 핵심 경로를 조절합니다. Pin1은 인산화된 단백질의 구조를 재형성함으로써 유비퀴틴 매개 분해(turnover)와 체크포인트 조절에 영향을 주어, 인산화 역학을 단백질 항상성(proteostasis)과 연결합니다. PIN1 활성의 이상 조절은 종양성 신호 프로그램과 신경퇴행성 과정과 연관되어 왔으며, 인산화 기반 조절 메커니즘 연구에서 널리 활용되는 핵심 노드로 여겨집니다.

Pin1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 PIN1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 PIN1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 PIN1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, PIN1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.