
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PI 3-kinase p110δ慢病毒激活颗粒(m) | sc-422232-LAC | 200 µl | $455.00 |
Pik3cd 编码 I 类磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)的催化亚基 p110δ。该关键酶可将 PIP2 磷酸化生成 PIP3,从而传递并放大 PI3K–AKT–mTOR 信号通路。在小鼠免疫与造血细胞谱系中,p110δ 有助于把抗原受体和细胞因子受体的输入信号耦联到下游对细胞存活、增殖、代谢和趋化的调控,并影响 NF-κB 与 FOXO 依赖的转录程序。由于其对淋巴细胞活化、炎症信号以及免疫稳态的影响,Pik3cd 活性改变被广泛研究,并与免疫失调模型及致癌通路重编程相关。这些功能使 Pik3cd 成为解析决定免疫细胞命运的信号转导网络的一个有用关键节点。
PI 3-kinase p110δ 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Pik3cd 表达。
PI 3-kinase p110δ 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Pik3cd转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PI 3-kinase p110δ表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Pik3cd 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。