PHF3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406857

概要

PHF3（PHDフィンガータンパク質3）は、RNAポリメラーゼIIと結合する核内の転写調節因子であり、転写伸長および共転写的RNAプロセシングの制御に寄与します。PHF3はPHDフィンガードメインと伸長装置との相互作用を介して、細胞状態の維持や刺激応答性転写に関連する遺伝子発現プログラムに影響を与えます。PHF3の活性が攪乱されると、転写の忠実性の変化や増殖制御ネットワークの破綻と関連することが示されており、クロマチン関連因子とRNA合成を結びつける機構の解明において重要な対象となります。そのためPHF3は、遺伝子発現制御、分化、ならびに疾患に伴う転写プログラムの再配線といった研究領域で注目されています。

PHF3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPHF3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PHF3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PHF3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PHF3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PHF3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PHF3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PHF3の機能に不可欠なPHF3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PHF3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PHF3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPHF3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PHF3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PHF3 HDRプラスミド（h）および PHF3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPHF3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPHF3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。