PDGF Receptor beta/PDGFRBCRISPR激活质粒(h): sc-400187-ACT

PDGFRB 编码血小板源性生长因子受体β（PDGFRβ），这是一种受体酪氨酸激酶，可与 PDGF‑BB 及相关配体结合，从而调控间充质细胞的增殖、生存与迁移。受体被激活后，PDGFRβ 发生自体磷酸化，并通过 PI3K–AKT、RAS–MAPK、PLCγ–PKC 和 STAT 等通路传递信号，协同细胞骨架重塑以及与细胞外基质的相互作用。该受体在血管发育和周细胞募集过程中起核心作用，支持血管稳定并促进组织修复。PDGFRB 信号失调或异常的 PDGFRB 融合与纤维增殖性状态、病理性血管生成以及肿瘤—基质互作有关，因此是研究基质生物学机制的重要靶点。

PDGF Receptor beta/PDGFRB CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PDGFRB的表达。

PDGF Receptor beta/PDGFRB CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的PDGFRB基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于PDGFRB转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性PDGF Receptor beta/PDGFRB表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的PDGFRB位点，并能够研究内源性位点上依赖于PDGF Receptor beta/PDGFRB的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PDGFRB表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PDGF Receptor beta/PDGFRB通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。