PDGF-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401977

概要

PDGFCは、分泌性増殖因子である血小板由来増殖因子C（PDGF-C）をコードしており、PDGF-Cはプロテアーゼによって活性化された後、主としてPDGF受容体複合体を介してシグナルを伝達し、間葉系細胞の増殖・遊走、および細胞外マトリックスのリモデリングを制御します。PDGF-Cは、間質（ストローマ）と上皮の各コンパートメント間のパラクライン性コミュニケーションに寄与し、組織の発生や修復を協調的に制御するPI3K–AKTやMAPK/ERKなどの下流経路を活性化します。PDGF-Cシグナルの制御異常は、さまざまな疾患状況において、異常な血管新生、線維化に関連したリモデリング、ならびに腫瘍—間質相互作用と関連しています。そのためPDGFCは、血管生物学、創傷修復、炎症性微小環境、腫瘍化シグナルのクロストークのモデルで頻繁に研究されています。

PDGF-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPDGFC遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PDGFC内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PDGFCのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PDGF-Cタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PDGF-Cシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PDGFC欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PDGF-Cの機能に不可欠なPDGFCエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PDGFCゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PDGF-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびPDGF-C CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PDGFC遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PDGF-C HDRプラスミド（h）および PDGF-C HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPDGFCホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPDGFC標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。