Papilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406332

Visão geral

PAPLN codifica a papilina, uma grande glicoproteína associada à matriz extracelular, caracterizada por múltiplos domínios modulares de interação que sustentam a organização da matriz e a arquitetura da membrana basal. A papilina está implicada na regulação de proteases extracelulares e no remodelamento da matriz, processos que influenciam a adesão celular, a migração e a morfogênese tecidual. Por meio dessas funções direcionadas pela matriz, o PAPLN é relevante para vias que conectam a dinâmica da matriz extracelular a programas de remodelamento do desenvolvimento e patológicos, inclusive em contextos em que a proteólise alterada e a organização do estroma contribuem para a biologia das doenças. O estudo de PAPLN dá suporte a investigações mecanísticas sobre a homeostase da matriz extracelular e as interfaces de sinalização entre célula e matriz.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Papilin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAPLN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAPLN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAPLN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Papilin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAPLN para a investigação da sinalização de Papilin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAPLN críticos para a função Papilin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAPLN para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Papilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Papilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAPLN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Papilin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Papilin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAPLN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAPLN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.