



주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
P5CR 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-410971-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
P5CR 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-410971-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PYCR1은 피롤린-5-카복실레이트 환원효소 1(P5CR)을 암호화하는 유전자로, 미토콘드리아 효소인 P5CR은 NAD(P)H 의존적으로 피롤린-5-카복실레이트를 프롤린으로 전환하는 반응을 촉매하여 글루탐산/오르니틴 대사와 프롤린 생합성을 연결합니다. 프롤린 사이클링에서의 역할을 통해 P5CR은 세포의 산화환원 균형, 미토콘드리아 항상성, 그리고 산화 스트레스 또는 영양 스트레스 하에서의 대사적 적응에 기여합니다. PYCR1의 활성은 아미노산 대사, 활성산소종(ROS) 완충, 그리고 프롤린 공급에 의존하는 세포외기질(ECM) 관련 과정과도 교차합니다. PYCR1의 유전적 교란은 결합조직 및 신경발달 관련 표현형과 연관된 것으로 보고되어, 대사 조절과 스트레스 반응 경로를 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.
P5CR 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 PYCR1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 PYCR1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 PYCR1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, PYCR1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
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