Plásmido Doble Nickase (h) p38IP: sc-409288-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)p38IP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa p38IP (h) y el plásmido de doble nickasa p38IP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SUPT20H. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: p38IP Anticuerpo (C-7): sc-374665
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) p38IP | sc-409288-NIC | 20 µg | $410.00 |
SUPT20H codifica p38IP, un adaptador conservado que se asocia con la señalización de MAPK p38 y con la maquinaria reguladora de la cromatina para coordinar la transcripción sensible al estrés. p38IP se ha relacionado con la modulación de las salidas de la vía MAPK y con la regulación de programas de expresión génica que influyen en la progresión del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas inflamatorias. A través de estas funciones, SUPT20H/p38IP contribuye a la homeostasis celular bajo estrés genotóxico y ambiental, y se estudia en contextos en los que la señalización MAPK desregulada y el control transcripcional están implicados en fenotipos relevantes para enfermedad, como la proliferación alterada y la señalización inmunitaria.
p38IP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SUPT20H en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SUPT20H. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SUPT20H. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SUPT20H alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.