Plásmido Doble Nickase (h) p38 alpha MAPK14: sc-400057-NIC

MAPK14 codifica p38α, una cinasa de serina/treonina activada por estrés de la familia MAPK que integra señales de citocinas inflamatorias, estrés oxidativo y estímulos ambientales. p38α regula cascadas de fosforilación que controlan programas de transcripción, la estabilidad del ARNm y la traducción de proteínas mediante vías que incluyen MAPKAPK2/3 y ATF2, así como la modulación aguas abajo de respuestas asociadas a NF-κB y AP-1. Influye en la apoptosis, los puntos de control del ciclo celular, la diferenciación y la señalización de la inmunidad innata, con un impacto amplio en la producción de citocinas y la adaptación celular al estrés. La desregulación de la señalización de MAPK14 se ha implicado en procesos inflamatorios y autoinmunes, neurodegeneración y señalización del microambiente asociado a tumores, lo que la convierte en un objetivo frecuente de estudios mecanísticos de vías.

p38 alpha MAPK14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAPK14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAPK14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAPK14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAPK14 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.