Plasmide Double Nickase (h) p38 alpha MAPK14: sc-400057-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) p38 alpha MAPK14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide p38 alpha MAPK14 Double Nickase (h) et le plasmide p38 alpha MAPK14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAPK14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: p38 alpha MAPK14 Antibody (F-9): sc-271120
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) p38 alpha MAPK14 | sc-400057-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) p38 alpha MAPK14 | sc-400057-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK14 code pour p38α, une kinase sérine/thréonine activée par le stress appartenant à la famille des MAPK, qui intègre les signaux des cytokines inflammatoires, le stress oxydatif et des stimuli environnementaux. p38α régule des cascades de phosphorylation contrôlant des programmes transcriptionnels, la stabilité des ARNm et la traduction des protéines via des voies incluant MAPKAPK2/3, ATF2, ainsi qu’une modulation en aval des réponses liées à NF-κB et à AP-1. Elle influence l’apoptose, les points de contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et la signalisation de l’immunité innée, avec un impact large sur la production de cytokines et l’adaptation cellulaire au stress. Une signalisation MAPK14 dérégulée a été impliquée dans des processus inflammatoires et auto-immuns, la neurodégénérescence et la signalisation du microenvironnement tumoral, ce qui en fait une cible fréquente d’études mécanistiques des voies de signalisation.
p38 alpha MAPK14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAPK14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAPK14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAPK14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAPK14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.