p115 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403918-LAC

USO1 kodiert p115, einen peripheren Membran‑Coiled‑Coil‑Tetheringfaktor, der das Andocken und die Fusion von Vesikeln im frühen sekretorischen Weg koordiniert. p115 überbrückt COPII‑abgeleitete Transportträger und Golgi‑Membranen durch Interaktionen mit Rab‑GTPasen und Golginen und unterstützt damit den Transport vom ER zum Golgi, die Organisation des Golgi‑Bandes (Golgi ribbon) sowie den mitotischen Wiederaufbau des Golgi. Über seine Rolle im Membrantransport und in der Organellarchitektur beeinflusst p115 die Proteostase, die Oberflächenlieferung von Rezeptoren und Integrinen sowie Signalausgänge, die mit Proliferation und Migration verknüpft sind. Dysregulierter sekretorischer Transport und Golgi‑Stress‑Signalwege unter Beteiligung von p115 wurden in Zusammenhängen wie Neurodegeneration, Infektionen und krebsassoziierten Veränderungen der Glykosylierung und Sekretion untersucht.

p115 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente USO1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

p115 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der USO1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen p115-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen USO1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.