Plasmide Double Nickase (h) ODCp: sc-410634-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ODCp correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ODCp Double Nickase (h) et le plasmide ODCp Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AZIN2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ODCp | sc-410634-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ODCp | sc-410634-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’AZIN2 humain code l’ornithine décarboxylase paralogue (ODCp), un régulateur de la voie des polyamines qui module les niveaux cellulaires de putrescine, de spermidine et de spermine en interagissant avec le contrôle antizyme‑dépendant de l’activité et du renouvellement de la décarboxylase. Par cette régulation, AZIN2 contribue à l’homéostasie des polyamines et influence des processus fondamentaux tels que la traduction, la progression du cycle cellulaire, le trafic vésiculaire et la différenciation. Un métabolisme des polyamines dérégulé est fréquemment associé à des modifications de la prolifération et des réponses au stress, ce qui fait d’AZIN2/ODCp une cible pertinente pour étudier la reprogrammation métabolique et le contrôle de la croissance dans divers états cellulaires liés aux maladies. L’expression d’AZIN2 a également été associée à des phénotypes sécrétoires spécialisés dans certains tissus, ce qui soutient l’exploration de la régulation, dépendante des polyamines, de la sécrétion et de la maturation cellulaire.
ODCp Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AZIN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AZIN2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AZIN2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AZIN2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.