NPY5-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421954

Visão geral

O gene **Npy5r** codifica o receptor Y5 do neuropeptídeo Y (NPY5-R), um GPCR acoplado a Gi/o que se liga ao neuropeptídeo Y e a peptídeos relacionados para modular os níveis intracelulares de cAMP e a sinalização de quinases a jusante. No sistema nervoso central, o NPY5-R contribui para a regulação do comportamento alimentar, da homeostase energética, da responsividade ao estresse e das saídas neuroendócrinas por meio da integração de circuitos hipotalâmicos e límbicos. A ativação do receptor influencia a transmissão sináptica, a excitabilidade neuronal e a plasticidade das redes neuropeptidérgicas, vinculando **Npy5r** a vias que controlam o apetite e a regulação metabólica. A desregulação da sinalização de NPY tem sido associada a fenótipos relacionados à obesidade e a processos afetivo‑relacionados ao estresse, tornando **Npy5r** um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NPY5-R (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Npy5r em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Npy5r, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Npy5r na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NPY5-R.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Npy5r para a investigação da sinalização de NPY5-R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Npy5r críticos para a função NPY5-R
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Npy5r para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NPY5-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NPY5-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Npy5r. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NPY5-R Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NPY5-R (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Npy5r para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Npy5r definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.