Plásmido Doble Nickase (h) NOXA1: sc-416586-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)NOXA1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NOXA1 (h) y el plásmido de doble nickasa NOXA1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NOXA1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NOXA1 Anticuerpo (H-6): sc-398873
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) NOXA1 | sc-416586-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) NOXA1 | sc-416586-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOXA1 (activador 1 de la oxidasa NADPH) codifica una subunidad reguladora que favorece la activación del complejo NOX1 de la oxidasa NADPH al facilitar su ensamblaje con p22phox y con proteínas organizadoras, impulsando así una producción controlada de especies reactivas de oxígeno (ROS). La señalización de ROS dependiente de NOXA1 contribuye a vías sensibles al estado redox que influyen en la remodelación del citoesqueleto, el tráfico vesicular y programas transcripcionales vinculados a la proliferación y a respuestas inflamatorias. Como modulador de la señalización oxidativa, NOXA1 se estudia en contextos en los que las ROS afectan la función de barrera epitelial y la señalización de la inmunidad innata, y en los que un equilibrio redox desregulado contribuye a fenotipos de estrés celular. La actividad alterada del eje NOX1/NOXA1 se ha investigado en modelos de inflamación crónica y de señalización asociada a tumores, lo que respalda su relevancia para la investigación mecanística.
NOXA1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NOXA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NOXA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NOXA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NOXA1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.