Norpeg CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408852

概要

RAI14 は Norpeg をコードしており、Norpeg は細胞骨格に関連するタンパク質として、アクチンに富む構造体の構築に関与し、細胞形態、接着、運動性の制御に寄与するとされています。Norpeg は、細胞骨格の再編成を協調させるシグナル伝達過程との関連が示されており、細胞移動や上皮／間葉系ダイナミクスにおける役割を支えると考えられています。発現解析および機能解析からは、RAI14 が細胞増殖制御や組織構築が変化する状況と関連づけられており、増殖性や浸潤性の表現型を研究する上で重要な対象となります。足場タンパク質様の因子として、Norpeg は、細胞骨格の組織化が細胞内シグナル伝達やストレス応答プログラムとどのように交差するのかを解明するための有用な切り口を提供します。

Norpeg CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRAI14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RAI14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RAI14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Norpegタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Norpegシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RAI14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Norpegの機能に不可欠なRAI14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RAI14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Norpeg CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNorpeg CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RAI14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Norpeg HDRプラスミド（h）および Norpeg HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRAI14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRAI14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。