Nkx-3.2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406906

Visão geral

NKX3-2 codifica o fator de transcrição homeobox Nkx-3.2, uma proteína nuclear de ligação ao DNA que regula programas de expressão gênica do desenvolvimento, particularmente aqueles que controlam a condrogênese e o padrão do esqueleto axial. O Nkx-3.2 modula a especificação de linhagens e a diferenciação ao coordenar redes transcricionais a jusante da sinalização por morfógenos, incluindo vias ligadas a sinais da família BMP e TGF-β. Alterações na atividade de NKX3-2 têm sido associadas a defeitos no desenvolvimento da cartilagem e do esqueleto e são frequentemente estudadas no contexto de displasias esqueléticas congênitas e de mecanismos de padronização craniofacial. Em sistemas baseados em células, NKX3-2 fornece um ponto de estudo acessível para dissecar o controle transcricional da diferenciação mesenquimal e a regulação de genes da matriz extracelular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nkx-3.2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NKX3-2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NKX3-2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NKX3-2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nkx-3.2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NKX3-2 para a investigação da sinalização de Nkx-3.2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NKX3-2 críticos para a função Nkx-3.2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NKX3-2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nkx-3.2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Nkx-3.2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NKX3-2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nkx-3.2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Nkx-3.2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NKX3-2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NKX3-2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.