Nicotinic Acetylcholine Receptor delta/CHRNDCRISPR激活质粒(h): sc-404001-ACT

CHRND 编码肌肉型烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）的 δ 亚基。nAChR 是一种配体门控离子通道，在神经肌肉接头处组装并介导快速突触传递。乙酰胆碱与受体结合后，受体通道开放，允许阳离子内流，将神经递质传递与膜去极化以及兴奋–收缩过程相耦联。CHRND 在胆碱能信号通路中参与受体组装、通道门控以及突触后稳定性维持。nAChR 亚基组成或功能的改变与神经肌肉传递障碍相关，因此 CHRND 常用于突触生物学与受体生物发生研究。

Nicotinic Acetylcholine Receptor delta/CHRND CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性CHRND的表达。

Nicotinic Acetylcholine Receptor delta/CHRND CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的CHRND基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于CHRND转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Nicotinic Acetylcholine Receptor delta/CHRND表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的CHRND位点，并能够研究内源性位点上依赖于Nicotinic Acetylcholine Receptor delta/CHRND的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在CHRND表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Nicotinic Acetylcholine Receptor delta/CHRND通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。