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Neurofibromin 2/NF2/Merlin双切口酶质粒(m) | sc-421862-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Neurofibromin 2/NF2/Merlin双切口酶质粒(m2) | sc-421862-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Nf2 基因编码神经纤维瘤蛋白 2(Merlin),这是一种膜—细胞骨架支架蛋白,能够整合来自细胞—细胞连接处的信号,从而抑制细胞增殖并维持上皮结构。Merlin 通过将皮质肌动蛋白与生长调控通路相连接(包括 Hippo 信号及其下游的 YAP/TAZ 转录程序),协调接触抑制与力学信号转导(mechanotransduction)。通过这些相互作用,NF2 调控受体转运与细胞骨架动态,从而影响细胞迁移、极性以及细胞周期控制。NF2 相关网络的失调与神经系统及间充质谱系中的组织稳态研究和肿瘤抑制机制密切相关。
Neurofibromin 2/NF2/Merlin 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Nf2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Nf2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Nf2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Nf2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。