neurexin I Plasmídeo duplo de Nickase (r): sc-437279-NIC
- alvos específicos: rat
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- neurexin IO plasmídeo de dupla Nickase (r) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase neurexin I (r) e o Plasmídeo Double Nickase neurexin I (r2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para . Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:neurexin Iα Anticorpo (17): sc-136001
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
neurexin I Plasmídeo duplo de Nickase (r) | sc-437279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
neurexin I Plasmídeo duplo de Nickase (r2) | sc-437279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A neurexina I (NRXN1) é uma molécula de adesão celular pré-sináptica que organiza a formação e a maturação das sinapses ao se ligar a parceiros pós-sinápticos, como neuroliginas e LRRTMs. Por meio de splicing alternativo, a neurexina I diversifica programas de reconhecimento sináptico e influencia a probabilidade de liberação de neurotransmissores, a ancoragem (docking) de vesículas e a exocitose dependente de cálcio, integrando-se a vias que controlam a montagem e a plasticidade sinápticas. Em modelos do sistema nervoso de rato, a função de NRXN1 é comumente estudada no contexto do equilíbrio excitatório/inibitório, da conectividade de circuitos e da remodelação dependente de atividade. Alterações na sinalização de neurexinas têm sido associadas na literatura a mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricas, sustentando seu uso para dissecar vulnerabilidade sináptica e fenótipos de rede in vivo e in vitro.
neurexin I O Plasmídeo de Nickase Dupla (r) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus em linhas celulares rat. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de . Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função . Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.