Neu4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406284

Visão geral

O NEU4 codifica a neuraminidase humana 4 (Neu4), uma sialidase que remove ácidos siálicos terminais de glicoproteínas e glicolipídios, modulando assim o turnover de glicoconjugados e a sinalização na superfície celular e em organelas. A atividade da Neu4 influencia os estados de sialilação lisossomal e mitocondrial e pode afetar processos como tráfego de membranas, autofagia e respostas ao estresse metabólico por meio de alterações na composição dos glicanos. Ao remodelar interações dependentes de sialilação, o NEU4 contribui para a regulação da sinalização imune e das decisões de destino celular em contextos nos quais os padrões de glicosilação são reconfigurados. A atividade de sialidase desregulada e a sialilação aberrante têm sido associadas a fenótipos inflamatórios e a alterações relacionadas ao câncer na adesão e invasão celular, tornando o NEU4 um alvo útil para estudos mecanísticos em glicobiologia.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Neu4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NEU4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NEU4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NEU4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Neu4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NEU4 para a investigação da sinalização de Neu4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NEU4 críticos para a função Neu4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NEU4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Neu4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Neu4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NEU4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Neu4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Neu4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NEU4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NEU4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.