NanogNB CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418788

概要

NANOGNB（NanogNB）はヒトのNANOG関連遺伝子で、多能性や初期発生期の遺伝子発現に関わる制御プログラムへの関与が示唆されています。幹細胞性（ステムネス）を担う中核回路のパラログ／関連因子として、NanogNBは転写制御、細胞運命の決定、エピジェネティック状態の維持という観点から研究されており、自己複製と分化を制御する経路とのクロストークの可能性も検討されています。NANOGファミリー遺伝子の発現変化は、腫瘍細胞の可塑性、生殖細胞生物学、リプログラミングのモデルにおいてしばしば評価されており、幹細胞様の転写ネットワークの変動が増殖や系譜決定に影響し得ます。したがってNANOGNBは、NANOG関連の制御アーキテクチャが発生過程および疾患関連の細胞表現型にどのように寄与するかを解析するための標的となります。

NanogNB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNANOGNB遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NANOGNB内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NANOGNBのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NanogNBタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NanogNBシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NANOGNB欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NanogNBの機能に不可欠なNANOGNBエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NANOGNBゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NanogNB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNanogNB CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NANOGNB遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NanogNB HDRプラスミド（h）および NanogNB HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNANOGNBホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNANOGNB標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。