NAIP Double Nickase Plasmid (h): sc-418189-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das NAIP Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- NAIP Double-Nickase-Plasmid (h) und NAIP Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf NAIP abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
NAIP Double Nickase Plasmid (h) | sc-418189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NAIP Double Nickase Plasmid (h2) | sc-418189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Humanes NAIP (neuronal apoptosis inhibitory protein) ist ein Mitglied der NLR-Familie, das als Sensor des angeborenen Immunsystems und Regulator der Inflammasom-Signalübertragung fungiert. NAIP erkennt bakterielle Liganden und kooperiert mit NLRC4, um den Aufbau des Inflammasoms zu fördern, was zur Aktivierung von Caspase-1 und zur nachgeschalteten Reifung von IL-1β und IL-18 führt – mit weiterreichenden Auswirkungen auf Pyroptose und die entzündliche Homöostase. Über diese Signalwege beeinflusst NAIP die Wirtsabwehr, Antworten der epithelialen Barriere sowie Aktivierungsprogramme von Immunzellen. Eine fehlregulierte Inflammasom-Aktivität und veränderte NAIP-Expression wurden mit entzündlichen Erkrankungen und tumorassoziierter Entzündung in Verbindung gebracht, wodurch NAIP einen nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung krankheitsrelevanter Immun-Signalnetzwerke darstellt.
NAIP Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des NAIP-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von NAIP abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die NAIP-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit NAIP-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.