NAIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418189

概要

NAIP（NLRファミリー・アポトーシス阻害タンパク質）は、自然免疫による感知と細胞生存の制御に関与する、ヒト細胞質内のNOD様受容体です。特定の細菌由来リガンドを認識し、炎症性カスパーゼ経路の活性化を補助することでインフラマソーム関連プロセスに関与し、IL-1ファミリーサイトカインの成熟やパイロトーシス応答に影響を与えます。これらの役割を通じて、NAIPはNF-κBシグナル伝達、宿主—病原体防御機構、ならびに炎症の恒常性を形作る細胞ストレス応答と交差します。NAIPの発現や機能の破綻は、感染や免疫介在性病態における炎症シグナルの変調と関連することが報告されており、炎症と細胞死の機構研究における重要な標的となっています。

NAIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNAIP遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NAIP内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NAIPのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NAIPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NAIPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NAIP欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NAIPの機能に不可欠なNAIPエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NAIPゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NAIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNAIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NAIP遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NAIP HDRプラスミド（h）および NAIP HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNAIPホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNAIP標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。