N4BP2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-412585-LAC

N4BP2 (NEDD4-Bindungsprotein 2) kodiert ein großes intrazelluläres Protein, das über Interaktionen mit E3-Ubiquitin-Ligasen der NEDD4-Familie an ubiquitinabhängiger Signalübertragung beteiligt ist. Beschriebene Funktionen bringen N4BP2 mit der Regulation von Proteinumsatz und -transport in Verbindung, mit nachgelagerten Effekten auf zelluläre Homöostase, Stressantworten und Signaltransduktionsnetzwerke, die von kontrollierter Ubiquitinierung abhängen. In immunologischen und hämatopoetischen Kontexten wurde die N4BP2-Expression mit der Modulation inflammatorischer Signalwege sowie RNA-/Protein-regulatorischer Prozesse assoziiert, was auf Rollen bei der Ausgestaltung von Zellzustandsübergängen hindeutet. Dysregulierte Komponenten des Ubiquitin-Systems, einschließlich NEDD4-interagierender Faktoren wie N4BP2, werden häufig auf Zusammenhänge mit Krebsbiologie, Neurobiologie und immunbezogenen Krankheitsmechanismen hin untersucht.

N4BP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente N4BP2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

N4BP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der N4BP2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen N4BP2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen N4BP2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.