Plasmide Double Nickase (h) Myosin Ia: sc-404995-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Myosin Ia correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Myosin Ia Double Nickase (h) et le plasmide Myosin Ia Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MYO1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Myosin Ia | sc-404995-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Myosin Ia | sc-404995-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **MYO1A** code la **myosine Ia**, une protéine motrice dépendante de l’actine, enrichie à la surface apicale des cellules épithéliales, où elle soutient l’architecture de la bordure en brosse et le couplage entre la membrane et le cytosquelette. La myosine Ia contribue à la dynamique de l’actine corticale, au trafic vésiculaire et aux processus de transport polarisé qui aident à maintenir l’organisation des microvillosités et la fonction de barrière épithéliale. Par ses rôles dans le remodelage du cytosquelette et la régulation de la tension membranaire, **MYO1A** est impliqué dans des voies contrôlant la polarité cellulaire, l’adhérence et l’homéostasie épithéliale. Une expression ou une fonction altérée de **MYO1A** a été associée à des dysfonctionnements épithéliaux et a été étudiée dans le contexte de la biologie gastro-intestinale et de modifications de la différenciation épithéliale liées à des maladies.
Myosin Ia Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MYO1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MYO1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MYO1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MYO1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.