MYL9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401577

Visão geral

MYL9 codifica a cadeia leve de miosina 9, uma cadeia leve regulatória que modula a contratilidade actina–miosina ao controlar a atividade motora da miosina II. O seu estado de fosforilação integra a sinalização mediada pela quinase da cadeia leve da miosina dependente de Ca²⁺/calmodulina e pelas vias RhoA–ROCK, regulando a formação de fibras de stress, a dinâmica das adesões focais e alterações na forma celular. O MYL9 contribui para a contração do músculo liso, bem como para processos não musculares, incluindo citocinese, migração celular e respostas contráteis de células endoteliais ou fibroblastos. A contratilidade e a remodelação do citoesqueleto associadas ao MYL9, quando desreguladas, têm sido relacionadas com alterações do tónus vascular, fibrose tecidual e comportamentos celulares invasivos relevantes para a biologia do cancro.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MYL9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYL9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYL9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYL9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MYL9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYL9 para a investigação da sinalização de MYL9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYL9 críticos para a função MYL9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYL9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MYL9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MYL9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYL9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MYL9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MYL9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYL9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYL9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.