MYH9 Double Nickase Plasmid (r): sc-437291-NIC
- Zielspezies: rat
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MYH9 Double Nickase Plasmid (r) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MYH9 Double-Nickase-Plasmid (r) und MYH9 Double-Nickase-Plasmid (r2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MYH9 Double Nickase Plasmid (r) | sc-437291-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYH9 Double Nickase Plasmid (r2) | sc-437291-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYH9 kodiert das nichtmuskuläre Myosin IIA, ein aktinabhängiges Motorprotein, das kontraktile Kräfte erzeugt und den Umbau des Zytoskeletts in unterschiedlichen Zelltypen koordiniert. Es ist ein zentraler Effektor der durch RhoA/ROCK regulierten Aktomyosin-Kontraktilität und trägt zu Zelladhäsion, Migration, Zytokinese sowie zur Aufrechterhaltung der Barriereeigenschaften von Epithel- und Endothelgeweben bei. Über seine Rolle in der Mechanotransduktion und im Vesikeltransport beeinflusst MYH9 Prozesse wie Wundheilung, die Beweglichkeit von Immunzellen und die Thrombozytenbildung. Eine Fehlregulation der mit MYH9 verknüpften zytoskelettalen Dynamik wird mit erblichen Thrombozytenstörungen und weiter gefassten Phänotypen in Verbindung gebracht, die Niere und Gehör betreffen; zudem wird MYH9 häufig im Kontext von Fibrose, Entzündung und Tumorinvasivität untersucht.
MYH9 Das Double-Nickase-Plasmid (r) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des -Lokus in rat-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die -Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit -Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.