MYH13 Plasmide Double Nickase (h): sc-400602-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MYH13 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MYH13 Double Nickase Plasmid (h) e il MYH13 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MYH13. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MYH13 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400602-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYH13 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400602-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYH13 codifica la catena pesante della miosina 13, una proteina motoria specifica del muscolo scheletrico a contrazione rapida che funge da generatore di forza ATP-dipendente all’interno del sarcomero actina–miosina. Come componente fondamentale dei filamenti spessi, MYH13 contribuisce alla cinetica della contrazione muscolare, all’organizzazione delle miofibrille e alla regolazione delle proprietà delle fibre contrattili attraverso il ciclo dei ponti trasversali actomiosinici. Il suo profilo di espressione lo collega a vie che governano la differenziazione del muscolo scheletrico, l’assemblaggio del sarcomero e l’accoppiamento eccitazione–contrazione. Alterazioni nella composizione delle catene pesanti della miosina e disfunzioni sarcomeriche sono implicate in fenotipi neuromuscolari e miopatici, rendendo MYH13 un bersaglio rilevante per lo studio dei meccanismi della funzione muscolare e dei difetti contrattili associati a malattia.
MYH13 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MYH13 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MYH13. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MYH13. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MYH13 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.