Particules Lentivirales d'Activation (m) mTOR: sc-425273-LAC

Le gène murin **Mtor** code la kinase sérine/thréonine mTOR, un régulateur majeur de la croissance cellulaire qui intègre la disponibilité en acides aminés, l’état énergétique, la tension en oxygène et les signaux des facteurs de croissance afin de coordonner les programmes anaboliques et cataboliques. En tant que cœur catalytique de **mTORC1** et **mTORC2**, mTOR contrôle la synthèse protéique via **S6K** et **4E‑BP1**, le métabolisme des lipides et des nucléotides, la suppression de l’autophagie, ainsi que l’organisation du cytosquelette via la signalisation **Akt/SGK**. La signalisation mTOR s’interface avec les voies **PI3K–Akt**, **AMPK**, **TSC1/2–Rheb** et les **GTPases Rag** pour équilibrer prolifération, adaptation au stress et homéostasie métabolique. Une activité mTOR dérégulée est largement étudiée en biologie du cancer, dans le neurodéveloppement et la plasticité synaptique, l’activation des cellules immunitaires et des modèles de maladies métaboliques, ce qui en fait un nœud central pour l’analyse mécanistique des voies de signalisation dans les systèmes murins.

Les particules d'activation lentivirales mTOR (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Mtor dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales mTOR (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Mtor, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de mTOR. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Mtor ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.