MTF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411609

Visão geral

MTF2 (fator de transcrição 2 de ligação ao elemento de resposta a metais) codifica a MTF-2, um regulador de cromatina associado ao grupo Polycomb que participa de programas de repressão transcricional que controlam a especificação de linhagem e a estabilidade do estado celular. A MTF-2 está ligada à função do PRC2 e ao silenciamento dependente de metilação de H3K27 em loci do desenvolvimento, influenciando a acessibilidade da cromatina e redes regulatórias gênicas de longo alcance. Por meio desses mecanismos epigenéticos, a MTF2 contribui para o controle da proliferação, da diferenciação e de respostas transcricionais a estresse. Atividade desregulada de MTF2 foi relatada em estudos de biologia do câncer e de distúrbios do desenvolvimento, nos quais o direcionamento alterado de Polycomb pode perturbar paisagens de expressão gênica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MTF-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MTF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MTF2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MTF2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MTF-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MTF2 para a investigação da sinalização de MTF-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MTF2 críticos para a função MTF-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MTF2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MTF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MTF-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MTF2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MTF-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MTF-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MTF2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MTF2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.