Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-415611

概要

MTX3は、ミトコンドリア外膜の構築やミトコンドリアタンパク質インポート複合体の生合成など、ミトコンドリア生物学に関与するとされるメタキシン（metaxin）ファミリーの一員であるメタキシン3をコードします。メタキシンは、ミトコンドリアタンパク質の輸送、ミトコンドリアの完全性維持、代謝とストレス応答の協調といった過程に関連しています。ミトコンドリア恒常性の破綻は多様な疾患状況に共通して見られる特徴であるため、MTX3はミトコンドリア動態と細胞の生存・分化を結び付ける機構を研究するうえで有用な遺伝子座です。MTX3の機能解析は、ミトコンドリアのインポート経路が下流シグナル伝達やエネルギー依存的な細胞プログラムにどのように影響するかを明らかにする助けとなります。

Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMTX3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MTX3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MTX3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Metaxin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Metaxin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MTX3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Metaxin 3の機能に不可欠なMTX3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MTX3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMetaxin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MTX3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Metaxin 3 HDRプラスミド（h）および Metaxin 3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMTX3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMTX3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。