MDFIC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421259

Visão geral

O gene murino **Mdfic** codifica a MDFIC, uma proteína nuclear semelhante a inibidores da família MyoD, implicada na regulação da transcrição e na modulação de programas de expressão gênica específicos de linhagem. Foi relatado que a MDFIC influencia a atividade de fatores de transcrição bHLH e está associada ao controle de estados de diferenciação celular e de saídas transcricionais relacionadas à proliferação. Por meio dessas funções regulatórias, a MDFIC pode interagir com vias que governam redes gênicas do desenvolvimento e respostas ao estresse ou ao crescimento dependentes do contexto. Alterações na expressão ou na função de MDFIC têm sido associadas na literatura a desregulação do controle transcricional relevante para a biologia do câncer e fenótipos do desenvolvimento, sustentando seu valor como alvo mecanístico de pesquisa.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MDFIC (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mdfic em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mdfic, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mdfic na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MDFIC.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mdfic para a investigação da sinalização de MDFIC, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mdfic críticos para a função MDFIC
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mdfic para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MDFIC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MDFIC Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mdfic. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MDFIC Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MDFIC (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mdfic para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mdfic definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.