MDFIC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421259

Descripción general

Mouse Mdfic codifica MDFIC, una proteína nuclear similar a los inhibidores de la familia MyoD, implicada en la regulación transcripcional y en la modulación de programas de expresión génica específicos de linaje. Se ha informado que MDFIC influye en la actividad de factores de transcripción bHLH y se asocia con el control de los estados de diferenciación celular y de las salidas transcripcionales relacionadas con la proliferación. A través de estas funciones reguladoras, MDFIC puede interactuar con vías que gobiernan redes génicas del desarrollo y respuestas dependientes del contexto al estrés o al crecimiento. La expresión o función alteradas de MDFIC se han asociado en la literatura con un control transcripcional desregulado relevante para la biología del cáncer y fenotipos del desarrollo, lo que respalda su valor como diana de investigación mecanística.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MDFIC (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mdfic en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mdfic junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mdfic tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MDFIC.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mdfic para la investigación de la señalización de MDFIC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mdfic críticos para la función de MDFIC
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mdfic para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MDFIC CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MDFIC CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mdfic. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MDFIC (m) y el plásmido HDR MDFIC (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mdfic para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mdfic definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.