MBOAT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426448

Visão geral

Mboat2 codifica a enzima membrane bound O-acyltransferase domain containing 2 (MBOAT2), uma aciltransferase associada ao retículo endoplasmático (RE) e a membranas, implicada na remodelação de fosfolipídios por meio da reacilação de lisofosfolipídios. Ao influenciar a incorporação de ácidos graxos em glicerofosfolipídios de membrana, a MBOAT2 pode afetar a composição das membranas, a homeostase de organelas e processos de sinalização dependentes de lipídios ligados às respostas celulares ao estresse. Alterações no metabolismo de fosfolipídios são amplamente relevantes para disfunção metabólica, inflamação e remodelação de membranas associada ao câncer, tornando a Mboat2 um ponto de partida útil para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados por lipídios. Em sistemas murinos, a perturbação genética de Mboat2 favorece análises em nível de via de redes de aciltransferases e de remodelação lipídica compensatória.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MBOAT2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mboat2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mboat2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mboat2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MBOAT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mboat2 para a investigação da sinalização de MBOAT2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mboat2 críticos para a função MBOAT2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mboat2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MBOAT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MBOAT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mboat2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MBOAT2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MBOAT2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mboat2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mboat2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.