Plásmido Doble Nickase (h) MAGE-C2: sc-405516-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MAGE-C2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MAGE-C2 (h) y el plásmido de doble nickasa MAGE-C2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MAGEC2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MAGE-C2 | sc-405516-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MAGE-C2 | sc-405516-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAGEC2 codifica MAGE-C2, un antígeno cáncer/testículo de la familia MAGE tipo I que normalmente está restringido a las células germinales, pero que con frecuencia se expresa de forma aberrante en tumores. MAGE-C2 participa en la homeostasis proteica modulando la actividad de ligasas E3 de ubiquitina mediante interacciones con socios que contienen dominios RING, lo que influye en la ubiquitinación y en el recambio dependiente del proteasoma. A través de estas vías, MAGE-C2 puede afectar programas celulares vinculados a respuestas al estrés, regulación del ciclo celular y señalización de supervivencia. Su perfil de expresión asociado a tumores y su inmunogenicidad lo convierten en un marcador ampliamente utilizado para estudiar la biología del cáncer, la presentación de antígenos y la adaptación de las células tumorales.
MAGE-C2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAGEC2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAGEC2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAGEC2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAGEC2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.