MAGE-C1 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-403336-ACT

O gene humano **MAGEC1** codifica a proteína **MAGE-C1**, um antígeno câncer/testículo predominantemente restrito às células germinativas, mas frequentemente reexpresso em neoplasias, onde pode modular programas celulares tumorais associados à sobrevivência e ao reconhecimento imunológico. A MAGE-C1 faz parte da família **MAGE tipo I** e tem sido associada à sinalização dependente de ubiquitina por meio de interações com ligases de ubiquitina E3 contendo domínio RING, influenciando a estabilidade proteica e vias de resposta ao estresse. A expressão desregulada de **MAGEC1** foi relatada tanto em tumores hematológicos quanto em tumores sólidos e é comumente utilizada como marcador molecular de expressão antigênica e de estados transcricionais na biologia tumoral. O estudo de **MAGE-C1** apoia investigações sobre apresentação de antígenos, regulação da proteostase e mecanismos de controle transcricional relevantes para fenótipos oncogênicos.

MAGE-C1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de MAGEC1 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

MAGE-C1 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus MAGEC1 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição MAGEC1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de MAGE-C1. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus MAGEC1 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de MAGE-C1 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via MAGE-C1 em células tumorais com expressão de MAGEC1 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.