Plásmido Doble Nickase (h) MafG: sc-401959-NIC

MAFG codifica MafG, un factor de transcripción bZIP de la familia small Maf que carece de un dominio de transactivación y funciona principalmente como un socio de dimerización obligatorio para factores de la familia CNC, como NFE2L2/NRF2, y para proteínas BACH. A través de estos heterodímeros, MafG se une a elementos de reconocimiento Maf/elementos de respuesta antioxidante para regular las respuestas al estrés oxidativo, el metabolismo de xenobióticos, la homeostasis del hemo y programas transcripcionales más amplios relacionados con el estado redox y la inflamación. La actividad de MafG se integra con la señalización KEAP1–NRF2 e influye en la adaptación celular al estrés electrofílico y metabólico. La expresión desregulada de MAFG o un equilibrio alterado entre small Maf y CNC se ha asociado con cambios en redes génicas antioxidantes y se ha observado en distintos contextos relevantes para la biología del cáncer, la neurodegeneración y los mecanismos de enfermedades inflamatorias crónicas.

MafG El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAFG en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAFG. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAFG. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAFG alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.