LOXL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401021-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LOXL2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LOXL2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LOXL2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LOXL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LOXL2 Anticorpo (3C5): sc-293427
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LOXL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401021-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOXL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401021-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LOXL2 (lysyl oxidase like 2) codifica uma amina oxidase secretada, dependente de cobre, que catalisa a desaminação oxidativa de resíduos de lisina no colágeno e na elastina, promovendo a formação de ligações cruzadas na matriz extracelular e a remodelação tecidual. Para além da maturação da matriz, a LOXL2 influencia a adesão e a migração celular e a mecanotransdução ao moldar a rigidez da matriz e a sinalização dependente de integrinas, tendo também sido associada a programas de transição epitélio–mesênquima e a redes responsivas à hipóxia. A expressão ou a atividade desregulada de LOXL2 está associada à remodelação fibrótica e à dinâmica do microambiente tumoral, tornando-a um alvo útil para estudar a biologia da matriz extracelular, a comunicação entre estroma e epitélio e fenótipos relacionados com invasão em sistemas de células humanas.
LOXL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LOXL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LOXL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LOXL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LOXL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.