LOXL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401965-NIC

LOXL1 codifica a lisil oxidase‑like 1, uma amino-oxidase dependente de cobre que catalisa a desaminação oxidativa de resíduos de lisina na elastina e no colágeno, promovendo a formação de ligações cruzadas covalentes e a maturação da matriz extracelular. Por meio da regulação da elastogênese e da fibrilogênese do colágeno, a LOXL1 contribui para a estabilidade mecânica dos tecidos, a sinalização célula–matriz e processos de remodelamento ligados ao reparo de feridas e a vias associadas à fibrose. Alterações na atividade ou na expressão de LOXL1 têm sido associadas à desregulação da matriz extracelular observada em distúrbios como a síndrome de esfoliação/glaucoma por esfoliação e fenótipos de remodelamento do tecido conjuntivo. Na biologia do câncer e em pesquisas sobre o estroma, a LOXL1 é estudada por seu papel na organização da matriz e por seu potencial impacto em microambientes permissivos à invasão.

LOXL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LOXL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LOXL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LOXL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LOXL1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.