LKLF/KLF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400918

概要

KLF2（LKLFとも呼ばれる）は、Krüppel様ジンクフィンガー型転写因子をコードしており、せん断応力に応答する遺伝子プログラムを統合的に制御することで、内皮細胞および免疫細胞の恒常性維持に寄与します。血管内皮では、KLF2がメカノトランスダクション（機械刺激の情報伝達）と転写制御を結び付け、抗炎症・抗血栓・バリア安定化に関わる経路を制御します。これには、一酸化窒素（NO）シグナルの調節や接着分子発現の制御が含まれます。造血系細胞系列では、KLF2がケモカイン受容体や活性化関連の転写ネットワークを調節することで、T細胞の静止状態（クワイエッセンス）、トラフィッキング（移動・循環）、分化に影響を与えます。KLF2活性の破綻は血管炎症や動脈硬化関連プロセスと関連付けられており、また複数のがんや免疫調節異常の文脈でも発現変化が報告されています。これらの知見は、KLF2が経路解析研究における機能的ノードとして有用であることを支持します。

LKLF/KLF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKLF2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KLF2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KLF2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LKLF/KLF2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LKLF/KLF2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KLF2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LKLF/KLF2の機能に不可欠なKLF2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KLF2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LKLF/KLF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLKLF/KLF2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KLF2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LKLF/KLF2 HDRプラスミド（h）および LKLF/KLF2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKLF2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKLF2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。