Lipocalin-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-415842

概要

LCN15はリポカリン15をコードしており、リポカリン15は、脂質やレチノイド様代謝産物などの小さな疎水性リガンドを結合して輸送する分泌タンパク質群であるリポカリンファミリーの一員です。リガンドを隔離し、受け渡す働きを通じて、リポカリン15は組織微小環境における細胞外シグナル伝達、膜の恒常性、細胞間コミュニケーションに影響を及ぼし得る位置づけにあります。リポカリンの発現変動は炎症、代謝ストレス応答、上皮リモデリングと関連することが報告されており、LCN15は脂質取り扱いおよびストレス適応経路を解明するための有用な標的となります。LCN15の機能を研究することで、分泌型キャリアタンパク質が傍分泌調節や疾患に伴う細胞状態の変化に結び付く機構の理解が深まります。

Lipocalin-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLCN15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LCN15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LCN15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Lipocalin-15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Lipocalin-15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LCN15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Lipocalin-15の機能に不可欠なLCN15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LCN15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Lipocalin-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLipocalin-15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LCN15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Lipocalin-15 HDRプラスミド（h）および Lipocalin-15 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLCN15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLCN15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。