Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) LC3B: sc-417828-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LC3B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LC3B (h) y el plásmido de doble nickasa LC3B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MAP1LC3B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LC3B | sc-417828-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LC3B | sc-417828-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP1LC3B codifica la cadena ligera 3B (LC3B) de las proteínas asociadas a microtúbulos 1A/1B, un componente central de la maquinaria de la autofagia que sufre lipidación dependiente de ATG7/ATG3 para formar LC3-II en las membranas de los autofagosomas. LC3B favorece la elongación del fagóforo y la captura de carga mediante motivos de región de interacción con LC3 (LIR) en receptores de autofagia selectiva como p62/SQSTM1, conectando sustratos ubiquitinados con la formación de autofagosomas. A través de estas interacciones, LC3B integra vías de detección de nutrientes y respuesta al estrés, incluidas las señales de mTOR y AMPK, para regular la proteostasis y el control de calidad de los orgánulos. La autofagia asociada a LC3B desregulada se ha implicado en neurodegeneración, biología de infecciones, disfunción metabólica y adaptación al estrés asociada al cáncer, lo que la convierte en un marcador de uso frecuente y en un nodo mecanístico en la investigación sobre autofagia.
LC3B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAP1LC3B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAP1LC3B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAP1LC3B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAP1LC3B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.