LBX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406846

Visão geral

LBX1 (ladybird homeobox 1) codifica um fator de transcrição homeobox que regula o padrão embrionário e a especificação de linhagens, com papéis proeminentes na diferenciação de interneurônios da medula espinhal e na migração de precursores do músculo esquelético. Por meio da ligação ao DNA de forma específica para determinadas sequências, o LBX1 ajuda a coordenar programas transcricionais que moldam o desenvolvimento dorsoventral do tubo neural e vias miogênicas durante a somitogênese. Variações genéticas e alterações na regulação de LBX1 têm sido associadas a fenótipos do desenvolvimento, incluindo suscetibilidade à escoliose idiopática do adolescente, destacando sua relevância para pesquisas em desenvolvimento musculoesquelético e neurodesenvolvimento. Em modelos celulares, o LBX1 é comumente estudado por seu impacto no estado de diferenciação, na manutenção da identidade celular e em redes transcricionais a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LBX1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LBX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LBX1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LBX1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LBX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LBX1 para a investigação da sinalização de LBX1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LBX1 críticos para a função LBX1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LBX1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LBX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LBX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LBX1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LBX1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LBX1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LBX1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LBX1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.