Krs-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416738-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Krs-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Krs-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Krs-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para STK3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Krs-1 Anticorpo (87.K): sc-130405
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Krs-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416738-NIC | 20 µg | $410.00 |
STK3 codifica a quinase de serina/treonina Krs-1 (também conhecida como MST2), um componente central da cascata de sinalização Hippo, que restringe a proliferação celular e promove a apoptose por meio da regulação de LATS1/2 e dos coativadores transcricionais YAP/TAZ. A Krs-1 integra sinais provenientes do contato célula–célula, da dinâmica do citoesqueleto e da sinalização de estresse para modular programas transcricionais que governam o controle do crescimento e a homeostase tecidual. Por meio de interação (cross-talk) com as vias MAPK, PI3K–AKT e de apoptose, STK3 influencia a progressão do ciclo celular, a diferenciação e as respostas ao estresse oxidativo e genotóxico. A desregulação de quinases da via Hippo, incluindo STK3, tem sido associada a alterações no controle do tamanho de órgãos e a fenótipos relacionados a tumores, tornando-o relevante para estudos de sinalização oncogênica, biologia epitelial e reconfiguração de vias de sinalização.
Krs-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus STK3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de STK3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função STK3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com STK3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.