Ki67 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421656

개요

Mki67는 증식 마커 단백질 Ki67을 암호화하며, 세포주기 진행과 밀접하게 연관된 핵 내 인자입니다. Ki67은 활발히 분열 중인 세포에서 널리 발현되지만, 휴지기(quiescence)에서는 발현되지 않습니다. 또한 Ki67은 염색질과 유사분열 염색체 주변부(mitotic chromosome periphery)에 결합해 염색체 조직화를 돕고, 유사분열이 제대로 진행되도록 기여하며, 간기(interphase) 동안에는 인(nucleolus) 구조 유지에도 관여합니다. Ki67의 발현은 DNA 복제, 유사분열, 체크포인트 조절을 포함한 핵심 세포주기 제어 프로그램과 연동되므로, 조직 및 배양 세포에서 증식 상태를 정량화하는 데 널리 활용됩니다. Ki67 수준의 이상 조절은 과증식(hyperproliferative) 표현형과 빈번히 연관되며, 마우스 모델에서 종양 생물학, 조직 재생, 면역세포 확장 연구 등에 활용됩니다.

Ki67 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mki67 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mki67 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mki67의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Ki67 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Ki67 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mki67 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Ki67 기능에 중요한 Mki67 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mki67 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Ki67 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Ki67 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mki67 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Ki67 HDR 플라스미드 (m) 및 Ki67 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mki67 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mki67 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.