Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-410855
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- karyopherin α3 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im karyopherin α3-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: karyopherin α3: sc-514101
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-410855 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
KPNA3 kodiert Karyopherin α3, einen Adapter aus der Importin-α-Familie, der klassische nukleäre Lokalisationssignale erkennt und sich mit Importin β zusammenschließt, um einen Ran-GTPase-abhängigen nukleozytoplasmatischen Transport durch den Kernporenkomplex zu vermitteln. Durch die Regulation des nukleären Imports von Transkriptionsfaktoren, Signalvermittlern und anderen Cargo-Proteinen beeinflusst KPNA3 Genexpressionsprogramme, die Kontrolle des Zellzyklus, Stressantworten und die angeborene Immunsignalgebung. Veränderte Dynamiken des nukleären Transports unter Beteiligung von Importin-Pathways wurden in verschiedenen Krankheitskontexten mit dysregulierter Proliferation, inflammatorischer Signalgebung und Wirt-Pathogen-Interaktionen in Verbindung gebracht. KPNA3 ist daher ein nützliches Ziel, um zu untersuchen, wie selektiver Cargo-Import zelluläre Phänotypen und Signaltransduktionsnetzwerke prägt.
Das karyopherin α3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des KPNA3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des KPNA3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von KPNA3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die karyopherin α3-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von KPNA3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der karyopherin α3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf KPNA3-Exone abzielen, die für die karyopherin α3-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere KPNA3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom karyopherin α3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom karyopherin α3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des KPNA3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das karyopherin α3 HDR-Plasmid (h) und karyopherin α3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von KPNA3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten KPNA3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.