IRF-2 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-402135-ACT

インターフェロン制御因子2（IRF2）は、I型インターフェロンシグナル伝達およびより広範な自然免疫関連遺伝子プログラムを調節する、DNA結合性転写因子IRF-2をコードします。IRF-2はインターフェロン刺激応答配列（ISRE）において、関連するIRFファミリー因子と競合しながらサイトカイン駆動性転写を微調整し、抗ウイルス応答、炎症の基調、ならびに細胞状態の決定に影響を与えます。これらの作用を通じて、IRF-2は抗原提示、アポトーシス、細胞周期に連動した転写ネットワークを制御する経路に影響します。IRF2の発現や活性の異常は、免疫機能不全やがんに関連する転写表現型と関連づけられており、免疫学およびがん化シグナル研究における機構的ハブ（要所）としての有用性を支持しています。

IRF-2 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性IRF2の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

IRF-2 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における IRF2 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はIRF2転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性IRF-2の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のIRF2遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるIRF-2依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびIRF2発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるIRF-2経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。