Plasmide Double Nickase (m) IRAK-4: sc-435222-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IRAK-4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IRAK-4 Double Nickase (m) et le plasmide IRAK-4 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Irak4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IRAK-4 | sc-435222-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IRAK-4 | sc-435222-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Irak4 code l’interleukin-1 receptor–associated kinase 4 (IRAK-4), une kinase sérine/thréonine qui constitue un nœud de signalisation proximal essentiel en aval des complexes récepteurs Toll-like et du récepteur de l’IL-1 dépendants de MyD88 dans les cellules immunitaires innées de la souris. Lors de l’engagement du récepteur, IRAK-4 favorise l’assemblage du myddosome et des événements de phosphorylation qui propagent le signal vers TRAF6, aboutissant à l’activation des voies NF-κB et MAPK et à l’induction de programmes géniques inflammatoires. Cet axe régule la production de cytokines, l’activation des leucocytes et les réponses antimicrobiennes, et il est largement étudié dans le contexte des inflammations dérégulées et des phénotypes de signalisation immunitaire. IRAK-4 constitue donc un point d’entrée moléculaire clé pour disséquer la signalisation des récepteurs de reconnaissance des motifs et le contrôle transcriptionnel inflammatoire dans des modèles cellulaires et in vivo.
IRAK-4 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Irak4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Irak4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Irak4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Irak4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.