IL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-421099-KO-2

概要

Il1r2 は、マウスのインターロイキン-1受容体タイプII（IL-1RII）をコードします。IL-1RII は高親和性のデコイ受容体で、IL-1α および IL-1β に結合し、IL-1R1/IL-1RAcP によるシグナル伝達に利用可能なリガンド量を制限することで、炎症促進性シグナルを抑制します。IL-1 による NF-κB および MAPK 経路の活性化を減弱させることにより、IL-1RII は骨髄系細胞および間質系コンパートメントにおけるサイトカインネットワーク、白血球動員、自然免疫活性化の形成に寄与します。IL-1RII の制御異常は、サイトカインバランスや組織の炎症トーンへの影響を介して、炎症性および自己免疫性の表現型と関連づけられています。そのため Il1r2 は、マウスモデルにおいて IL-1 応答性を制御する機構、デコイ受容体の生物学、ならびに炎症の収束と遷延（持続）を規定する要因を検討する目的で用いられます。

IL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるIl1r2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il1r2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il1r2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-1RIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-1RIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il1r2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-1RIIの機能に不可欠なIl1r2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il1r2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-1RII CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il1r2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-1RII HDRプラスミド（m）および IL-1RII HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl1r2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl1r2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。