Partículas Lentivirales de Activación (m2) IL-15Rα: sc-421090-LAC-2
- Especies Diana: mouse
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m2) IL-15Rα es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m2) IL-15Rα incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el IL-15Rα Plásmido de activación lentiviral (m2) y el IL-15Rα Plásmido de activación lentiviral (m22) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor Il15ra. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-15Rα Anticuerpo (G-3): sc-374023
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (m2) IL-15Rα | sc-421090-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
El gen murino Il15ra codifica la subunidad alfa del receptor de interleucina-15 (IL-15Rα), una subunidad de unión de alta afinidad que captura la IL-15 y permite su transpresentación a complejos IL-2/15Rβ–γc en linfocitos respondedores, amplificando así la señalización JAK1/JAK3–STAT5. Mediante este mecanismo, IL-15Rα regula el desarrollo, la supervivencia y la activación de las células NK y de los linfocitos T CD8+ de memoria, y moldea la homeostasis inmunitaria impulsada por citocinas durante la inflamación. La actividad desregulada del eje IL-15/IL-15Rα se ha implicado en patologías autoinmunes e inflamatorias y en las interacciones tumor-inmunidad a través de una función alterada de los linfocitos citotóxicos. Los modelos de ratón con edición de Il15ra y las células inmunitarias derivadas de ellos se utilizan para dilucidar el tráfico del receptor de citocinas y la transpresentación, cartografiar los programas transcripcionales aguas abajo y evaluar la regulación inmunitaria en la infección, la autoinmunidad y microambientes relevantes para el cáncer.
Las partículas de activación lentiviral IL-15Rα (m2) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Il15ra en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral IL-15Rα (m2) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Il15ra, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de IL-15Rα. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Il15ra y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.