Partículas Lentivirales de Activación (m) IL-10: sc-421076-LAC

La interleucina-10 de ratón (Il10) codifica la IL‑10, una citocina inmunorreguladora pleiotrópica producida por múltiples subpoblaciones de leucocitos, que limita la inflamación excesiva y promueve la homeostasis tisular. La IL‑10 señaliza principalmente a través del complejo del receptor de IL‑10 para activar las vías JAK1/TYK2–STAT3, lo que conduce a la supresión de programas de citocinas proinflamatorias y a la modulación de la presentación de antígenos y de los estados de activación de las células mieloides. Mediante sus efectos sobre la polarización de macrófagos, la maduración de células dendríticas y la función efectora de las células T, la IL‑10 ayuda a configurar el diálogo entre la inmunidad innata y adaptativa en tejidos de barrera y linfoides. La actividad alterada de IL‑10 se estudia con frecuencia en el contexto de la inflamación intestinal, la autoinmunidad, la inmunopatología asociada a infecciones y la regulación inmunitaria vinculada a tumores en modelos murinos.

Las partículas de activación lentiviral IL-10 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Il10 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral IL-10 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Il10, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de IL-10. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Il10 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.